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      引物純化方式選擇指南

      為了提高純化效率,提高引物合成質量,安升達提供多種引物純化方式:DSL(脫鹽)純化,tPAGE純化,hPAGE純化,HPLC純化。

       

      tPAGE和hPAGE純化

      tPAGE純化和hPAGE純化是安升達針對原PAGE純化技術進行升級后推出的兩種引物純化方式,可以應用于不同長度類型的引物,純化效果優于PAGE純化級別,價格更優惠!

      tPAGE: 針對60 mer以下的普通引物,推出的PAGE級別的純化方式,擁有更優的合成程序。相比于傳統PAGE,純化速度快,質量更穩定。

      hPAGE對60 mer以上的普通引物的純化特別有效。雙重精制,既可以去除合成中的短鏈引物也可以去除合成中的鹽分,保證引物的純度。對90mer以下的引物,hPAGE純化后,純度可大于90%。

       

      其他引物純化方式介紹

      脫鹽(DSL):又稱為簡易反相柱,氨鹽可以被有機溶液洗脫,但不會被水洗脫,能有效的去除鹽分,純度可滿足大多分子生物學實驗需求。優點:速度快,價格優,通量大。缺點:該方法不能有效去除比目的片段略短的引物小片段。

      高效液相(HPLC):采用高效液相色譜的原理,對引物DNA進行純化是一種非常有效的純化方式,能達到很高的純度和靈敏度。純化后,引物的純度可大于90% 。特別適合用于短鏈(小于40 mer)引物和修飾引物的純化。優點:對純化短鏈引物(<40 mer)特別有效,缺點:成本高,批量生產效率不高。如實驗對純度要求非常高,建議選用HPLC與hPAGE雙重精制。

       

      引物純化方式的適用范圍及建議

      純化方式 引物要求 應用
      5~10 mer 11~40 mer 41~60 mer 61~90 mer 91~150 mer
      DSL純化 適用 適用 適用 適用 不適用 常用于PCR擴增、亞克隆、點突變、全基因合成及Sanger測序等。
      tPAGE純化 適用 推薦 推薦 不適用 不適用 針對60 mer以下的普通引物,推出的PAGE級別的純化方式。
      hPAGE純化 不適用 適用 適用 推薦 推薦 對60 mer以上的普通引物的純化特別有效,用于定點突變、克隆、
      蛋白結合凝膠遷移電泳分析、治療與診斷。
      HPLC純化 推薦 推薦 適用 適用 不適用

      小于40 mer的普通引物的純化,用于定點突變、克隆、
      蛋白結合凝膠遷移電泳分析、治療用途;

      修飾引物的純化;

      商業化的診斷引物或探針。

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