為了提高純化效率,提高引物合成質量,安升達提供多種引物純化方式:DSL(脫鹽)純化,tPAGE純化,hPAGE純化,HPLC純化。
tPAGE純化和hPAGE純化是安升達針對原PAGE純化技術進行升級后推出的兩種引物純化方式,可以應用于不同長度類型的引物,純化效果優于PAGE純化級別,價格更優惠!
tPAGE: 針對60 mer以下的普通引物,推出的PAGE級別的純化方式,擁有更優的合成程序。相比于傳統PAGE,純化速度快,質量更穩定。
hPAGE:對60 mer以上的普通引物的純化特別有效。雙重精制,既可以去除合成中的短鏈引物也可以去除合成中的鹽分,保證引物的純度。對90mer以下的引物,hPAGE純化后,純度可大于90%。
脫鹽(DSL):又稱為簡易反相柱,氨鹽可以被有機溶液洗脫,但不會被水洗脫,能有效的去除鹽分,純度可滿足大多分子生物學實驗需求。優點:速度快,價格優,通量大。缺點:該方法不能有效去除比目的片段略短的引物小片段。
高效液相(HPLC):采用高效液相色譜的原理,對引物DNA進行純化是一種非常有效的純化方式,能達到很高的純度和靈敏度。純化后,引物的純度可大于90% 。特別適合用于短鏈(小于40 mer)引物和修飾引物的純化。優點:對純化短鏈引物(<40 mer)特別有效,缺點:成本高,批量生產效率不高。如實驗對純度要求非常高,建議選用HPLC與hPAGE雙重精制。
純化方式 | 引物要求 | 應用 | ||||
5~10 mer | 11~40 mer | 41~60 mer | 61~90 mer | 91~150 mer | ||
DSL純化 | 適用 | 適用 | 適用 | 適用 | 不適用 | 常用于PCR擴增、亞克隆、點突變、全基因合成及Sanger測序等。 |
tPAGE純化 | 適用 | 推薦 | 推薦 | 不適用 | 不適用 | 針對60 mer以下的普通引物,推出的PAGE級別的純化方式。 |
hPAGE純化 | 不適用 | 適用 | 適用 | 推薦 | 推薦 | 對60 mer以上的普通引物的純化特別有效,用于定點突變、克隆、 蛋白結合凝膠遷移電泳分析、治療與診斷。 |
HPLC純化 | 推薦 | 推薦 | 適用 | 適用 | 不適用 |
小于40 mer的普通引物的純化,用于定點突變、克隆、 修飾引物的純化; 商業化的診斷引物或探針。 |